梯度PCR儀與普通PCR儀的區(qū)別在于溫度的控制上面，普通PCR的孔所有溫度是一樣的，而梯度PCR儀卻能夠讓不同的孔有不同溫度，比如橫向有12個孔，退火溫度可以從低到高。

 

　　梯度PCR儀與普通PCR儀的區(qū)別主要是在功能上，而功能的體現(xiàn)主要是在溫度上，而在性能上的體現(xiàn)確實大大不同的。由于傳統(tǒng)的普通PCR儀一次只能運(yùn)行一個特定的退火溫度，因此如果要設(shè)置不同的退火溫度，那么就需要多次運(yùn)行才能夠?qū)崿F(xiàn)，這一過程需要花費(fèi)大量的時間

 

　　PCR儀實際就是一個溫控設(shè)備，能在95℃，55℃，72℃之間很好地進(jìn)行溫度控制，而梯度PCR儀的梯度也要做一下介紹，梯度實際上是指PCR時退火溫度條件可以設(shè)置一系列不同的溫度梯度，因此人們把這樣的PCR儀稱之為是梯度PCR儀。廣泛應(yīng)用于科研、教學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、檢驗、檢疫等領(lǐng)域的一款儀器設(shè)備，在實驗室中的應(yīng)用頻率很高，

 

　　PCR跑膠，目的條帶很亮，但是邊沿不清楚，前后有拖尾現(xiàn)象。出現(xiàn)這樣的問題，則需要進(jìn)行細(xì)致的分析，因為引起該問題的可能很多?？上葯z查是否模板質(zhì)量問題，如有降解等，模板應(yīng)避免反復(fù)凍融。

 

　　也有可能是抽提RNA時有污染，則需要重新抽提RNA。此外，也可能是非特異性擴(kuò)增引發(fā)該問題，可提高退火溫度，少循環(huán)次數(shù)。電泳緩沖液時間太長，ph值和鹽離子濃度明顯改變、電泳時電壓太高、電泳液過久沒換，電泳膠臟了等都可能引發(fā)該問題。

 

　　如果不是由上述原因引起，則進(jìn)一步檢查加樣量是否過大，制膠過程中膠孔是否制好，EB是否沖洗干凈、模板中是否混有基因組DNA或蛋白等。也需考慮是否擴(kuò)增的條件不合適。針對具體原因再采取相應(yīng)的措施。